免疫印跡（Western Blot）
（1）技術(shù)原理
蛋白免疫印跡( Western Blot) 是將電泳分離后的細(xì)胞或組織總蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上，然后用特異性抗體檢測(cè)某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)。蛋白質(zhì)樣品經(jīng)過(guò)PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)分離，轉(zhuǎn)移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。
（2）技術(shù)應(yīng)用
Western印跡法主要用于未知蛋白質(zhì)的檢測(cè)及抗原組分、抗原決定蔟的分子生物學(xué)的測(cè)定；也可用于未知抗體的檢測(cè)和單克隆抗體的鑒定等，同時(shí)可用于疾病的早期診斷和預(yù)后的跟蹤分析檢測(cè)。
【服務(wù)內(nèi)容】
提取蛋白、測(cè)定蛋白濃度、蛋白SDS-PAGE或PAGE凝膠電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、抗體雜交、顯色，實(shí)驗(yàn)結(jié)束提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)方法及免疫印跡的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)圖表。
（1）客戶須明確檢測(cè)目的和具體要求，最好能提供1~2篇文獻(xiàn)或資料。
（2）客戶提供的標(biāo)本需要新鮮或取材后-80℃保存，避免蛋白的降解；標(biāo)本反復(fù)凍融不得超過(guò)2次以上。
（3）如提供組織，需0.5g以上；如提供細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)應(yīng)達(dá)到1×106以上。
（4）客戶提供足夠?qū)嶒?yàn)用量的特異性一抗，抗體應(yīng)在gnaling technology，Abcam，Cayman Chemical，Santan Cruz，Zymed等知名抗體公司購(gòu)買保證質(zhì)量。
actin 1 p38
